Implications cliniques et de contrôle d’infection de l’infection de Clostridium difficile avec l’immunoessai négatif d’enzyme pour la toxine

Implications cliniques et de contrôle d’infection de l’infection de Clostridium difficile avec l’immunoessai négatif d’enzyme pour la toxine

Dans une étude prospective de patients avec un diagnostic d’infection CDI Clostridium difficile par réaction en chaîne de la polymérase,% avait immunoessais enzymatique Résultats EIA négatifs pour la toxine Les patients EIA négatifs avec CDI ne différaient pas dans la présentation clinique des patients EIA-positifs et présentaient un risque similaire pour la transmission des spores

Les immunodosages enzymatiques pour les toxines A et B sont couramment utilisés pour le diagnostic des infections à Clostridium difficile car ils sont faciles à utiliser et fournissent des résultats rapides Cependant, les EIA pour la toxine ont une faible sensibilité par rapport à la culture toxigène. Test CDI Dans une évaluation récente, les EIA disponibles dans le commerce et les tests de flux latéral pour la détection de la toxine ont une sensibilité moyenne de%,% -%, comparée à celle de la culture toxigène . Les tests PCR pour la détection des gènes de toxines peuvent fournir une méthode alternative rapide et sensible pour le diagnostic de CDI [,,] Cependant, les tests de PCR sont plus chers que les EIA et nécessitent un équipement spécialisé En outre, il n’est pas clair si l’utilisation de tests sensibles les méthodes aboutiront à des résultats cliniques ou de contrôle des infections améliorés Les niveaux de toxine dans les selles pouvant être corrélés avec la sévérité de la diarrhée , il est plausible que de nombreuses Les patients atteints d’ICD avec des résultats négatifs d’EIA pourraient avoir de faibles niveaux de toxines dans le tractus intestinal, entraînant une diarrhée moins sévère et moins de spores. Nous avons testé l’hypothèse selon laquelle les patients atteints d’ICD diagnostiqués par PCR maladie et réduction de l’excrétion des spores, comparativement aux patients dont les résultats d’EIE sont positifs

Méthodes

Le centre médical de Cleveland Veterans Affairs est un hôpital tertiaire de soins tertiaires Au cours de l’étude, un test de diagnostic de CDI a été réalisé en utilisant EIA pour la glutamate déshydrogénase Wampole C diff Chek-, Inverness Medical comme un écran initial et un test PCR commercial pour les gènes de la toxine B Becton Dickinson pour confirmation Le laboratoire a rejeté des échantillons de selles formées et a effectué des tests répétés seulement si des jours se sont écoulés après un test antérieur. Le comité d’examen institutionnel du Centre médical de Cleveland Veterans Affairs a approuvé le protocole d’étude d’octobre à juillet. ont reçu un diagnostic d’ICD, défini comme la présence de selles non formées en l’absence d’une autre cause évidente et de résultats positifs au test de la glutamate déshydrogénase et de PCR Après le test PCR, les échantillons ont été analysés à l’aide d’un EIA commercial pour la toxine Wampole C difficile Médical; Comparativement à la culture toxigénique, la sensibilité et la spécificité du test sont respectivement% et% Des échantillons positifs à la PCR ont été cultivés pour C difficile toxigène comme décrit précédemment La revue des dossiers médicaux a été effectuée pour obtenir des informations sur les caractéristiques démographiques, les maladies Des informations sur la durée de la diarrhée et le nombre de selles par jour ont été obtenues grâce à des entretiens avec des patients et des infirmiers et par examen des dossiers médicaux. Les cas de CDI ont été classés comme cas communautaires ou associés à la communauté. -modéré, sévère ou sévère-compliqué sur la base des définitions des lignes directrices actuelles Pour les patients hospitalisés, des cultures ont été obtenues quelques jours après le diagnostic d’ICD pour évaluer le potentiel d’acquisition des spores sur les mains gantées. , bras et main, et rail de lit de l’aine et de l’environnement, table de chevet, et sites de bouton d’appel Les cultures ont été obtenus et traités comme décrit précédemment Tous les isolats de C difficile ont été testés pour la production de cytoxine in vitro en utilisant C difficile Tox A / B II Inverness Medical; Pour déterminer la prévalence des souches de ribotype épidémique, un sous-groupe d’isolats de selles a été soumis à un ribotypage PCR Un ribotypage PCR a également été réalisé pour comparer les isolats des selles, de la peau et des sites environnementaux. Les distributions des caractéristiques cliniques et démographiques et les proportions de contamination des sites cutanés et environnementaux ont été comparées chez les patients EIA-positifs et EIA-négatifs. Le test t de Student non apparié a été utilisé pour les données normalement distribuées. tests ont été utilisés pour les données catégoriques Les données ont été analysées avec le logiciel statistique SPSS, la version SPSS et le logiciel STATA, la version StataCorp

RÉSULTATS

Parmi les patients qui ont reçu un diagnostic d’ICD basé sur la présence de selles non formées et de résultats positifs de glutamate déshydrogénase et de PCR,% avaient des résultats positifs pour la sensibilité à la toxine,% vs PCR fournit une comparaison des caractéristiques et des résultats Patients séronégatifs Il n’y avait pas de différences significatives entre les groupes en termes de caractéristiques cliniques, nombre de selles par jour, CDI, CDI sévère ou sévère-compliquée, ou récidives Neuf patients EIA-négatifs présentant un CDI sévère, et% présenté avec un ICD sévère-compliqué, y compris un patient décédé d’un ICD fulminant

Tableau Caractéristiques de base et résultats des patients atteints de Clostridium difficile diagnostiqués par une réaction en chaîne de la polymérase pour les gènes de la toxine B Caractérisation Caractérisation immuno-enzymatique positive n = Dosage immunoenzymatique négatif n = P Âge, intervalle moyen des années – – sexe masculin Mouvements intestinaux non formés, moyenne non / d – – & lt; Les selles non formées / d Les conditions cliniques Diabète sucré Maladie pulmonaire chronique Maladie rénale terminale & gt; Cancer Maladie neurologique Paraplégie Maladie cardiaque Lieu de résidence de soins de longue durée Usage antibiotique au cours des derniers jours Hospitalisation & gt; heures dans les jours passés Mobilité limitéea Classification des CDI Communauté-fréquentée Grave, non compliquéed Traitement sévère et compliqué des CDI Métronidazole Vancomycine Métronidazole et vancomycine Résultat Recurrencef Décès dus à toute cause Décès dû aux CDI … Caractéristique Caractérisation immuno-enzymatique positive n = Dosage immuno-enzymatique négatif n = P Âge, intervalle moyen des années – – sexe masculin Mouvements intestinaux non formés, intervalle moyen no / d – – & lt; Les selles non formées / d Les conditions cliniques Diabète sucré Maladie pulmonaire chronique Maladie rénale terminale & gt; Cancer Maladie neurologique Paraplégie Maladie cardiaque Lieu de résidence de soins de longue durée Usage antibiotique au cours des derniers jours Hospitalisation & gt; heures dans les jours passés Mobilité limitéea Classification des CDI Communauté-fréquentée Grave, non compliquéed Traitement sévère et compliqué des CDI Métronidazole Vancomycine Métronidazole et vancomycine Résultat Recurrencef Décès dus à une cause Décès dû à un ICD … NOTE Les données ne sont pas% de patients, sauf indication contraire CDI, infection à C difficile, score de mobilité ≤ sur le score de Braden pour la prédiction de l’ulcère de pression, risque de diarrhée dans la communauté ou ≤ heures après l’admission dans un établissement de santé, maladie de diarrhée dans la communauté ou ≤ heures après admission dans un établissement de santé, à condition que l’apparition des symptômes était & gt; wk après la dernière sortie d’un établissement de soins de santé infection à C. difficile associée à une leucocytose avec un nombre de globules blancs ≥, cellules / mL ou un taux sérique de créatinine ≥ fois le niveau prémorbide, mais sans hypotension, septicémie, iléus ou infection à mégacolone associée à une hypotension ou à un choc, à un iléus ou à une infection par le mégacôrol difficile survenant ≤ semaines après le début d’un épisode antérieur, à condition que les symptômes de l’épisode précédent aient été résolus avec ou sans traitement.

Figure Vue largeDownload slideRobot ribotype analyse d’isolats de Clostridium difficile cultivés à partir d’échantillons de selles de patients atteints d’infection à C difficile et d’isolats concomitants acquis sur des mains gantées après contact avec la peau et les sites environnementaux Patients ayant des souches binaires toxiniques et nonpidémiques positif, souche PCR-ribotype EIA, immunodosage enzymatique pour les toxines A et B; PCR, amplification en chaîne par polymérase pour les gènes de la toxine B BD GeneOhm; VA, souche binaire toxine-négative, non-épidémique témoin; VA, binaire toxine positive, PCR-ribotype épidémieFigure View largeTélécharger slideRobot ribonucléotidique des isolats de Clostridium difficile cultivés à partir d’échantillons de selles de patients infectés par C difficile et d’isolats concomitants acquis sur des mains gantées après contact avec la peau et les sites environnementaux Patients et toxine binaire -negative, souches nonpidémiques Le patient avait une souche EIA de PCR-ribotype positive à la toxine binaire, un immunodosage enzymatique pour les toxines A et B; PCR, amplification en chaîne par polymérase pour les gènes de la toxine B BD GeneOhm; VA, souche binaire toxine-négative, non-épidémique témoin; VA, toxine binaire positive, souche PCR-ribotype épidémique d’échantillons de selles PCR-positives soumises à culture,% cultivé C difficile toxigène L’échantillon PCR-positif qui ne cultivait pas C difficile toxigène provenait d’un patient EIA-positif qui a reçu empirique oral vancomycine Avant la collecte des selles et chez qui les cultures cutanées étaient positives chez les patients ayant des cultures cutanées et environnementales, les fréquences d’acquisition de C difficile sur les mains gantées n’étaient pas significativement différentes après le contact avec la peau. %, respectivement; P = & gt; et environnement% et%, respectivement; P & gt; Chez les patients ayant des isolats d’acquisition de selles et de main appariés après contact avec la peau et / ou les sites environnementaux, les isolats d’acquisition de selles et de mains présentaient des ribotypes de PCR identiques à ceux des isolats de selles, de peau et d’environnement. % étaient des souches de ribotype PCR positives à la toxine binaire La proportion de patients infectés par des souches de ribotype était significativement plus élevée dans le groupe EIA-positif que dans le groupe EIA-négatif [%] vs [%] de; P =

DISCUSSION

Nous avons constaté que près d’un tiers des patients ayant un ICD diagnostiqué avec un algorithme de test de la glutamate déshydrogénase et de la PCR auraient été oubliés si seule une EIE avait été réalisée pour les tests de toxine. Notamment,% des patients EIA-négatifs présentant un CDI sévère, y compris un patient décédé d’un ICD fulminant. Les patients ayant un CDI avec des résultats négatifs à la toxine EIA ont été infectés par des souches EIA-négatives. Ces résultats suggèrent que l’utilisation de méthodes de test d’ICD basées sur la PCR pourrait potentiellement améliorer les résultats cliniques et de contrôle des infections, par rapport à l’utilisation de l’EIA pour les toxines A et Plusieurs études suggèrent que la PCR peut fournir un test de diagnostic unique pour l’ICD qui combine une sensibilité excellente et% sensible, par rapport à culture alternative et résultats rapides [,,] On peut aussi utiliser une méthode d’essai -step qui inclut la détection de glutamate déshydrogénase par EIA comme méthode de criblage initiale Dans certaines études, les tests de glutamate déshydrogénase ont démontré une excellente sensibilité , mais d’autres ont suggéré que ce test n’est pas suffisamment sensible pour être utilisé comme criblage initial de CDI Si EIA pour la toxine A et B est utilisé comme deuxième étape dans un algorithme -step, un test supplémentaire, tel qu’une culture toxigène ou PCR , devrait être disponible pour tester des échantillons dans les cas où l’ICD est suspecté mais le résultat de l’EIE est négatif. Une prévention efficace de la transmission du C difficile dépend de l’identification rapide et précise des patients atteints d’ICD Nos résultats démontrent que les patients EIA-négatifs risque important de transmission L’utilisation de tests de diagnostic avec une sensibilité accrue pourrait donc être bénéfique pour les efforts de contrôle des infections visant à contrôler l’ICD. l’utilisation de méthodes sensibles qui détectent les organismes de type C difficile, comme la PCR et la culture toxigène est que les faibles niveaux d’organismes peuvent représenter une colonisation plutôt qu’une ICD Il est donc recommandé aux laboratoires de ne pas tester les selles formées. Notre étude a quelques limites Notre population de patients comprenait principalement des hommes, et le ribotype était la souche circulante prédominante D’autres études sont nécessaires dans d’autres contextes La glutamate déshydrogénase et la PCR ont été utilisées pour des tests diagnostiques. nous avons été incapables de déterminer les résultats des patients EIA négatifs avec CDI s’ils n’avaient pas été traités. En pratique, certains patients suspectés d’ICD peuvent être traités de manière empirique malgré des résultats négatifs de toxine EIA Bien que le laboratoire ait rejeté des échantillons de selles formées, nous n’avons pas exigé la présence de ≥ selles non formées en quelques heures dans notre cas Cependant, il n’y avait pas de différence significative dans le pourcentage de cas avec & lt; Finalement, nous avons évalué seulement le dosage EIA commercial. En conclusion, nos résultats démontrent que les patients avec un CDI diagnostiqué par glutamate déshydrogénase et PCR mais avec des résultats négatifs de toxine EIA ne le sont pas. diffèrent dans la présentation clinique des patients positifs pour l’EIA et présentent un risque important de transmission de spores Ces résultats suggèrent que l’EIE pour la toxine ne devrait pas être considérée comme un test unique pour le diagnostic du soutien financier du CDIF. interestC JD est consultant pour ViroPharma, Optimer, Merck et GOJO et a reçu des subventions de recherche de ViroPharma et Ortho-McNeil Tous les autres auteurs: Aucun conflit signaléTous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels. pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués dans les remerciements tion

Sylvie

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