Transmission intranasale du virus de l’hépatite C: données cliniques et virologiques

Transmission intranasale du virus de l’hépatite C: données cliniques et virologiques

Nous démontrons la plausibilité virologique de la transmission intranasale en confirmant que le sang et l’ARN du VHC sont présents dans les sécrétions nasales et les implants de reniflage du VHC par le virus de l’hépatite C par voie intranasale. utilisateurs de drogues intranasales infectés par le VIH recrutés dans une clinique de santé communautaire à New York

ea avec une prévalence élevée d’infection par le VHC pouvant aller jusqu’à% chez les utilisateurs de drogues non injectables Critères d’admissibilité: âge, ⩾ ans; consommation de drogues intranasales autodéclarée; et un résultat positif d’un test sanguin quantitatif de PCR VHC Globalement, les patients inscrits à l’étude et fourni un consentement éclairé Les protocoles d’étude ont été approuvés par les comités d’examen institutionnelsLes informations médicales suivantes ont été obtenues: résultats quantitatifs et viraux, anticorps contre l’hépatite B Les sujets ont répondu à une brève enquête, en espagnol ou en anglais, portant sur les caractéristiques démographiques, les facteurs de risque d’infection par le VHC, l’utilisation de drogues injectables et non injectables, l’état de santé et l’état nasal. Des échantillons de sang ont été prélevés pour PCR quantitative Deux échantillons de sécrétions nasales de chaque narine ont été prélevés avec des tampons nasaux Dacron et placés dans des mL de réactif TRIZOL Gibco BRL pour la détection de l’ARN ou mL de solution OBTI pour la détection sanguine. nouvelles pailles de soude emballées couramment utilisées par snif de drogue Pour éviter les effets néfastes des substances en poudre reniflantes, on a demandé aux sujets de «respirer l’air» tout en imitant leur comportement habituel de reniflement du médicament processus. L’ARN du VHC a été isolé à partir du sérum en utilisant le kit QIAamp MinElute Qiagen; L’ARN du VHC a été isolé à partir des sécrétions nasales et des instruments reniflants en utilisant le TRIzol Gibco BRL sur la base des protocoles établis. Le premier brin d’ADNc a été synthétisé par ImProm-IITM Reverse Transcription System Promega en utilisant des amorces descendantes spécifiques du gène ciblant la région centrale du VHC. avec une modification mineure de l’amorce amont R -‘-ATGTACCCCATGAGGTCGGC- ‘L’ADNc de HCV a été amplifié par PCR avec des cycles de dénaturation ° C pendant s, d’annelage ° C pendant s et d’allongement ° C pendant s avec des amorces F -‘- TAGACCGTGCACCATGAGC- ‘Et les produits PCR ont été détectés par Southern blot en utilisant une sonde marquée au P’ -AGGAAGACTTCCGAGCGGTCGCAA-‘HCV ADNc a été amplifié à partir d’échantillons sanguins HCV-positifs choisis au hasard avec l’utilisation de Pfu polymérase haute fidélité Perkin Elmer en utilisant des amorces R et F et clone dans un vecteur de clonage TA Invitrogen Le pTA_HCV a été utilisé pour préparer des courbes standard allant de × à des copies de l’ARNm du VHC, qui ont été effectuées en parallèle à chaque série d’échantillons. L’intensité de l’ADN b ets a été évalué par densitométrie en utilisant le système d’analyse d’image Kodak; la charge VHC pour l’échantillon a été calculée sur la base de la valeur numérique dérivée de la courbe de titrage du VHC. La charge VHC a été calculée comme le nombre de copies par millilitre pour les échantillons sanguins et le nombre de copies par échantillon pour les sécrétions nasales et les implants. Les courbes de titrage médico-légales ont été préparées à l’aide de l’hémoglobine humaine Sigma dans des dilutions allant de à μg / mL La concentration de sang dans chaque échantillon a été établie en comparant l’intensité de l’OBTI entre l’échantillon et le sang. La pathologie de la cavité nasale a été évaluée pour chaque patient par examen nasal antérieur, rendant des diagnostics sur les pathologies nasales. La rhinite a été diagnostiquée sur la base des symptômes classiques d’apparition de sécrétions muqueuses et nasales. Rhinosinusite définie par inflammation symptomatique des sinus paranasaux et la cavité nasale Prévalences de l’échantillon de l’ARN du VHC et o Quatre-vingt-quinze pour cent des IC ont été calculés autour des estimations ponctuelles en utilisant la méthode de Wald ajustée. Des statistiques descriptives ont été calculées pour les descripteurs d’échantillons et les mesures de pathologie nasale. Notre taille d’échantillon limitée excluait les tests statistiques de signification, p. ex. entre les variables virologiques et cliniques Résultats Tous les patients présentaient une hépatite C chronique active. La charge sérique du VHC variait de à ,, copies / mL médiane, copies / mL Des biopsies hépatiques récentes avaient été réalisées chez des patients; toutes les maladies hépatiques chroniques indiquées, avec des stades allant de à des niveaux récents d’alanine aminotransférase étaient disponibles pour les patients; Le dépistage des anticorps anti-VIH a révélé que% des sujets étaient positifs pour les anticorps anti-VIH et% étaient positifs pour les anticorps contre le virus de l’hépatite B. Des traces de sang ont été détectées en% de la sécrétion nasale les échantillons se situent entre – μg / mL et sur% de la gamme des instruments renifleurs, – μg / mL ARN du VHC a été détecté dans les échantillons de sécrétion nasale%; Gamme de niveaux d’ARN du VHC, – copies / échantillons et sur les instruments renifleurs%; Niveau d’ARN du VHC, et copies / échantillon Les estimations de prévalence suggèrent un écart important entre la présence de% de sang et la présence d’ARN du VHC dans les échantillons de sécrétion nasale. ; des échantillons contenant du sang occulte, étaient négatifs pour la figure de l’ARN du VHC

Figure View largeTélécharger slideHépatite C VHC ARN et sang occulte dans les sécrétions nasalesFigure View largeTélécharger diapositive Hépatite C virus ARN du VHC et sang occulte dans les sécrétions nasalesLa prévalence de la rhinite dans cette cohorte était élevée% En revanche, la prévalence de la rhinosinusite% est cohérente avec celle de population générale Plus de% des sujets ont souffert de rhinorrhée ou de congestion nasale au moins une fois par semaine,% d’hémorragies au nez signalées au moins une fois par semaine et% et% de lésions muqueuses et de croûtes, respectivement. à l’utilisation de drogues intranasales Quatre personnes% ont été observées avoir des perforations septales nasales; % avaient une perforation nasopalatale; et% ont présenté des symptômes de déformation du saddlénose Ces pathologies ont été associées à une détérioration avancée de la cavité nasale associée à l’usage chronique de drogues intranasales

Tableau Vue largeDownload slideFréquence des symptômes de la pathologie nasale chez les utilisateurs de drogues intranasalesTable View largeDownload slideFréquence des symptômes de la pathologie nasale chez les utilisateurs de drogues intranasalesDiscussion Nos résultats ont révélé une forte prévalence de% sanguin dans les sécrétions nasales des renifleurs de médicaments HCV-positifs à long terme. Plus particulièrement, cette étude a démontré que des particules de sang et de VHC peuvent être transférées sur des instruments de reniflement, p. Ex., Des pailles lors de l’utilisation de drogues intranasales simulées. Des études ont montré que le VHC peut rester viable. La prévalence du VHC dans les sécrétions nasales et sur les pailles reniflantes est probablement une estimation conservatrice. Il est raisonnable de supposer que le VHC sera présent dans les fosses nasales. sécrétions avec plus de fréquence et de quantité pendant les épisodes d’activité Le reniflement de la drogue, qui peut exacerber la décharge des fluides nasaux et du sang, contredit l’hypothèse selon laquelle, chez les personnes ayant des échantillons de sérum positifs pour le VHC, la détection du sang implique la présence du VHC. OBTI n’ont pas été réalisés sur les mêmes échantillons. Deuxièmement, le test OBTI pour le sang détecte les complexes immuns entre l’hémoglobine humaine hHb et les anticorps monoclonaux anti-hHb, qui peuvent se produire même en l’absence de cellules viables En revanche, la PCR ne peut détecter que l’ARN du VHC Par conséquent, l’écart entre la forte prévalence du sang occulte et la détection relativement faible de l’ARN du VHC dans les sécrétions nasales peut être associé à la détérioration rapide de l’ARN viral dans l’environnement nasal ou à la destruction des particules virales par l’immunité muqueuse. les particules dans les sécrétions nasales sont modérées par la pathologie nasale ou l’immunité, ce qui pourrait expliquer les résultats épidémiologiques contradictoires Cette étude établit la validité des conditions préalables virologiques primaires nécessaires à la transmission intranasale du VHC: la présence de sang et de VHC dans les sécrétions nasales des utilisateurs de drogues intranasales, et le transfert du sang et du VHC de la cavité nasale vers la sécrétion nasale. En outre, la fréquence et la sévérité des pathologies nasales observées dans cette cohorte pourraient aggraver les conditions facilitant la transmission intranasale du VHC. Par conséquent, ces résultats apportent un soutien virologique et clinique important à l’hypothèse de transmission intranasale du VHC. , la détection du VHC dans les sécrétions nasales fait avancer le débat sur la transmission iatrogène et nosocomiale potentielle du VHC dans le contexte des oreilles, du nez et de la gorge et des pratiques cliniques connexes Plus de recherches sont nécessaires pour confirmer la transmission intranasale comme mode d’infection virale. impact sur l’e plus large pidémie d’infection par le VHC

Remerciements

Nous remercions Enrique Pouget pour son aide à la gestion des données et Jeanine Botta pour son assistance technique et administrative. Dr KK Lam fournit des conseils sur la révision des manuscrits. Soutien financier Les Instituts nationaux de la santé, l’Institut national de la toxicomanie et l’Institut national du diabète et des maladies digestives et rénales R DA aux conflits d’intérêts potentiels JMMP Tous les auteurs: aucun conflit

Sylvie

Les commentaires sont fermés.